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点击磜en?12 fa布时间:2020-06-03

原代细胞培养是建yi细胞系的diyi步,但是you很多小伙伴在原代细胞上就会you很多疑惑哦,zhuyaoyou以蟣u复體en题,小编都为大家整理好咯,ban上你的小板凳,yi起来看看!

 yi、原代细胞与细胞系you什么区别?

答:根据chuantong定yi,自组织diyi磜en栈窈徒觶hong的细胞被称为原代细胞,这类细胞zhi接从组织分离,sheng命zhou期youxian,jing数次chuan代hou会逐渐停止sheng长。原代细胞在youxian的sheng命zhou期内需掌握好细胞的大sheng长kong间,以保持细胞群中基因型和表型的yizhi衴uⅫ/p>

细胞系是不断sheng长、分化的细胞群,因其jingguoyichuan改造,zhishi其具you无xian增长的潜能。体外sheng长的细胞系用于医疗或科研。

但蔰ao噬希琷ingguo长时间、连续的chuan代培养hou,细胞系随zhou代数的增加,细胞的基因型和表型都you可能fasheng改变。

需yaozhi出的是,在不tong的科研小组中这xie术语的定yi会yousuo不tong。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群,除非细胞jingguo了yichuan改造。 

二、倍增和代数you什么区别?

答:倍增是培养物中细胞总数的翻倍,tong常是zhi细胞zhi数或对数sheng长期。代数是zhi细胞群从培养瓶中移出,chuan代培养guo程的磜en琧huan代培养的目的,是shi细胞处于低密du以刺激其进yi步sheng长。 

 三、統ou盏降膁ongcun细胞该如he处理?

答:收到包装箱hou,立jijiangdongcun细胞从gan冰移入ye氮中dongcun。此guo程尽量快,以避免升温。不yaojiang细胞储cun在-80℃,这yang会对细胞造cheng不可挽回的伤害。 

四、dongcun的细胞该如he开始培养?

答:zhuyao分为以xia9点:

1.jiangyi管细胞从ye氮罐中qu出,注意保护手和眼睛。

2.jiangdongcun管快su的放入37℃水yu中,轻轻握住并旋转,zhi到管内物体wanquanrong化。

3.jiangdongcun管立ji从水yu中拿出,擦gan,转入无菌环境。

4.用70%的酒jingchong洗dongcun管,然hou擦去多余酒jing。

5.打开盖子,注意手zhi不yaopeng到里面的螺纹(注意,由于dongcun管you负压,开盖时可能会you少量yi出,这是正常现象)。

6.用多聚纃an眘uan(或参照说明书)包被培养瓶。多数细胞推jian的接zhong密du为每ping方厘mi5000个细胞。

7.盖好培养瓶的盖子,轻轻摇huang培养瓶以shi细胞分布均詑uH粜鑩ao气体jiao换可打开盖子。

8.jiang培养瓶放入培养箱中(37℃,5%CO2,95%kong气)

9.放入培养箱hou第6-16小时更换yi次培养基,以去除残留的二甲基亚枫和未贴壁的细胞。 

五、细胞培养guo程中,多久更换yi次培养基?

这qu决于细胞sheng长的su秖ui般而言2-3天更换yi次培养基,许多细胞培养实验室tong常在zhouyi,zhou三,zhou五更换培养基。

注意:dongcun细胞复suhou,在6-16小时内更换培养基,以去除残留的二甲基亚枫和死wang的细胞。 

六、wo能扩增培养和再次dongcun原代正常人类细胞吗?

答:这qu决于细胞的类型。yixie细胞类型像shenjing细胞,shenjing胶质细胞和yixiesheng长缓man的上皮细胞,不推jian扩增培养和再次dongcun。其它的细胞类型像cheng细胞、xing形细胞、肾系膜细胞、xing形胶质细胞等等,可以扩增培养和再次dongcun。

然而,需yao注意的是再次dongcun的guo程可能daozhi细胞sheng长性能的改变。

qi、培养瓶中应该加入多少体积的培养基?

答:women推jian的用量为:T-25培养瓶5ml,T-75培养瓶15ml,T-150培养瓶30ml。

 

    

 
上yi篇 : wo司讲解e扪猶ing培养基的基本配方是什么?    xiayi篇 :  解析:胎牛血qing运用中遇到的常见wen题
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