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点击次数:191 fa布shi间:2020-06-09

jing历了天然培养基、合成培养基hou,无血清培养基和无血清培养成为当今细胞培养领yu的一大趋势。采用无血清培养縮han档蜕鷆han成本,jian化分离纯化bu骤,避mian病毒污染造成的危害。

无血清培养基是bu需要添加血清就可以维持细胞在体外jiao长shi间生长繁殖的合成培养基。但是tamen可能bao含个别蛋白或大量蛋白zu分。sui然基础培养基紋ou倭垦錽uo配制的完全培养基可以满足大部分细胞培养的要求,但duiyou些实验却bu适合,如观察一种生长因子dui某种细胞的作用,这shi需要排除其ta生长因子的gan扰作用。而血清中可能含you各种生长因子;又如需要ceding某种细胞在培养过程中分泌某种物质的能力;或者要大规模的培养某种细胞,以获得tamen的分泌chan物。因此研制出无血清培养基一直是生物科xue工作者努力的目标。

无血清培养基的基本配方为基本成分为基础培养基及添加zu分两大部分。用于生物制药和疫苗生chan的细胞在体外培养shi,多数呈贴壁生长或兼xing贴壁生长;而当其在无血清、无蛋皕hou嘌猩hi,you于缺乏血清中的各种粘附贴壁因子如纤粘连蛋白、ceng粘连蛋白、胶原、玻表粘连蛋白,细胞往往以悬浮形式生长。

添加zu分bao括以下ji大lei物质:

(1)促贴壁物质:许多细胞bi须贴壁才能生长,这种情况下无血清培养基中一ding要添加促贴壁和扩展因子,一般为细胞外基质,如纤连蛋白、ceng粘连蛋白deng。tamen还是重要的分裂su以及维持正chang细胞功能的分化因子,dui许多细胞的繁殖和分化,qizhou重要作用。纤连蛋白zhu要促进来自中胚ceng细胞的贴壁与分化,这些细胞bao括硈hang赴⑷饬鱿赴⒘O赴⑸鰏hang皮细胞、肾shangxian皮质细胞、CHO细胞、成肌细胞deng。

(2)促生长因子及激su:针duibu同细胞添加bu同的生长因子。激su也是ci激细胞生长、维持细胞功能的重要物质,you些激su是许多细胞bibu可少的,如胰岛su。

(3)酶抑制剂:培养贴壁生长的细胞,需要用胰酶消化传代,在无血清培养基中bibu可少须含酶抑制剂,以终zhi酶的消化作用,达到保护细胞的目的。*chang用的是大豆胰酶;抑制剂。

(4)结簒i鞍缀蛕huan运蛋白:changjian如zhuantie蛋白和牛血清白蛋白。牛血清白蛋白的添加bijiao大,可增加培养基的粘度,保护细胞mian受机械损伤。许多旋zhuan式培养的无血清培养基du含you牛血清白蛋白。

(5)微量元su:硒是zuichangjian的。

 
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