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点击次数:113 发布时间:2020-06-16

我们知道,Elisa试剂盒可fenwei多种类型测定,是一种广泛应yong在测定液体yang本中的蛋白、抗体、huoji素的mian疫fen析技术。 我公司技术部将各种Elisa常yong方法的优蕄ing邮平卸詁i,结果ru下:

一、zhi接法(direct Elisa)

将抗原zhi接固定在固相载体上,加ru酶标记的一级抗体,即可测定抗原总量,ci一级抗体的特异性非常重要。

1.优势:cao作手续简短,因wuxu使yong二抗可避mian交互反应。

2.劣势:试验中的一抗都得yong酶标记,但bu是每种抗体都适合zuo标记,费yong相对提高。

二、间接法(indirect Elisa)

ci测定方法与zhi接法类似,差别在于一级抗体mei有酶标记,gaiyong酶标记的二级抗体qu辨识一级抗体lai测定抗原量。

1.优势:二抗可以加强xin号,er且有多种选择能zuobu同的测定fen析。bu紋ong副昙堑囊患犊固逶蚰躡ao留它zui多的mian疫反应性。

2.劣势:交互反应发生的机率较高。

san、双抗体夹心法(sandwich Elisa)

被jian测的抗原包被在两个抗体之间,qi中一个抗体将抗原固定于固相载体上,即bu捉抗体。ling一个则是jian测抗体,ci抗体可yong酶标记后zhi接测定抗原的量;huobu标记,再透过酶标记的二级抗体lai测定抗原的量。这两种抗体必xu小心选取,才可避mian交互反应huo竞争相同的抗原结合部位。

1.优势:高ling敏、高专一性,抗原wuxu事先纯hua。

2.劣势:抗原一定得拥有两个以上的抗体结合部位。

四、竞争法(competitive Elisa)

 yang本里的抗原(自you抗原)和纯hua并固定在固相载体上的抗原(固定抗原)一起竞争相同的抗体,当yangpin里的自you抗原越多,就可以结合越多的抗体,er固定抗原就只能结合dao较少的抗体,反之亦然。经清洗步骤,洗qu自you抗原和抗体的复合wu,只留下固定抗原和抗体的复合wu,拿lai与只有固定抗原的对照组结果相bi较,genju呈色差异就可计算chuyangpin里的抗原含量。

1.优势:可适yongbi较bu纯的yang本,er且数ju再现性很高。

2.劣势:整体的敏感性和专一性都较差。

五、ELISA技术:ji于细胞法(cell-based Elisa)

是一种新的定性蛋白jian测技术,将细胞zhi接在微孔板里培yang,daijian测蔮ao琤u需抽提蛋白和裂解细胞,便可zhi接测量微孔板里蛋白经ci激huo抑制作yong后的变hua。

1.优势:wu需裂解细胞,所以目标蛋白损失zui少,可测定wan整细胞、nian附细胞、还有非粘附细胞。

2.劣势:bu能测定抗原量。

以上这些nin都明白了ma?想要了解更多相关narong咨xun。

 
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