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点击次数:40 发布时间:2020-07-21

洗涤这是实验操作guo程中看似很简单但you至guanzhongyao的一个buzhou,所以今天小杨结he技术人员的jian议和指dao来给你men普及一下这方mian小zhi识。

shengwu试剂的洗涤方法

1. 自动洗板机:mei孔加入洗涤液350μl,注入与xi出间ge60秒。洗板5次。

2. shou工洗板ein孔na液体,在洁jing的xi水zhi上拍干,mei孔加洗涤液350μl,浸pao1-2分钟,xi去(不可触及板壁)或甩掉酶标板na的液体,在厚的xi水zhi上拍干。洗板5次。

shengwu试剂实验开shi前,各试剂均应平衡至shi温;试剂或样品配制时,均需充分hunyun,并jin量避免qipao。

1.加样:分别设空白孔、标准孔、dai测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或dai测样品100μl,注意不yao有气pao,加样时将样品加于酶标板底部,jin量不触及孔壁,轻轻晃动hunyun。给酶标板覆膜,37℃孵育2小时。为保zheng实验结果有效性,mei次实验qing使用新的标准品rong液。

 2.弃去液体,甩干,mei个孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使觤en?5分钟na配制),酶标板加蓌i材ぃ?7℃温育1小时。

3.弃去孔na液体,甩干,洗板 3次,mei次浸pao1-2分钟,大约350μl /mei孔,甩干并在xi水zhi上轻拍将孔na液体拍干。

4.mei孔加HRP Conjugate工作液(临觤en?5分钟na配制)100μl,加蓌i材ぃ?7℃温育1小时。

5.弃去孔na液体,甩干,洗板5次,方法同buzhou3。

6.mei孔加底wurong液100μl,酶标板加蓌i材?7℃避光孵育15分钟左右(根ju蔰ao氏钥鲎men樗醵袒蜓映ぃ豢蒫haoguo30分钟。当标准孔出现明显梯度时,即可终止)。

7.mei孔紋ou罩挂?0μl,终止fan应,此时蓝色立zhuan黄色。终止液的加入顺序应jin量与底wu液的加入顺序相同。

8.立即用酶标仪在450nm波长测量各孔的光密度(OD值)。应提莂n蚩副暌莇ian源,预热仪器,设置好检测程序。

9.实验完毕后将未用完的试剂an规ding的保存温度放hui冰箱保存至有效期结束。

 
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